تست رتروویروس

روش های تشخیص

اصول روش

تمرکز نظارتی

سنجش همزمان کشت

این روش از سلول های شاخص حساس برای جذب ذرات ویروسی عفونی استفاده می کند و با مشاهده پدیده هایی مانند اثرات سیتوپاتیک، تشکیل کانونی یا بیان آنتی ژن خاص، وضعیت آلودگی را تعیین می کند. می تواند وجود ذرات رتروویروسی عفونی را نشان دهد.

• اهداف آزمایش اجباری: سلول‌های EOPC یا سلول‌های عبور محدود تولید-.

• روش آزمایش هسته: باید از یک سیستم-همکاری{1}}دو مرحله ای (مرحله تقویت ویروس و مرحله نشانگر فعالیت) استفاده شود.

• الزامات سلولی حساس: بسته به گونه و منشاء سلول های مورد آزمایش، باید از رده های سلولی مختلف یا چندگانه برای سنجش عفونت رتروویروسی استفاده شود.

• الزامات انتقال فرهنگ: سیستم هم‌فرهنگ باید حداقل 5 بار (معمولاً بیشتر) عبور داده شود تا از تقویت کافی ویروس بالقوه اطمینان حاصل شود.

میکروسکوپ الکترونی انتقالی

این روش از میکروسکوپ الکترونی عبوری با وضوح بالا برای مشاهده مستقیم مورفولوژی و ساختار ذرات ویروسی (مانند ساختار پوشش ایکوسادرال و مورفولوژی نوکلئوکپسید) استفاده می‌کند که امکان شناسایی بصری و تجزیه و تحلیل کمی را فراهم می‌کند. این می تواند ذرات ویروسی شناخته شده و ناشناخته، از جمله ذرات غیر{2}}تکثیر شونده یا آنهایی که توسط سنجش عفونی ثبت نشده اند را شناسایی کند.

• اهداف آزمایش اجباری: سلول‌های EOPC یا سلول‌های عبور محدود تولید-.

• نیاز هسته: نوع و کمیت ذرات رتروویروسی باید مشخص شود.

• الزامات نمونه: برش بسیار نازک مورد نیاز است، که معمولاً مستلزم مشاهده سیستماتیک حداقل 200 سلول است.

• مقررات ویژه (Chinese Pharmacopoeia 2025): برای سلول های جوندگان خاص (به عنوان مثال، CHO، BHK-21) یا سلول های حشرات، مقدار ذرات ویروسی در مایع برداشت و عفونی بودن آنها نیز باید تعیین شود.

سنجش ترانس کریپتاز معکوس

بر اساس ویژگی ترانس کریپتاز معکوس که سنتز DNA از یک الگوی RNA را کاتالیز می کند، حضور رتروویروس ها را می توان به طور غیرمستقیم با شناسایی سیگنال های رادیواکتیو یا فلورسنت محصولات واکنش برای تعیین کمیت فعالیت آنزیم تعیین کرد. این روش مستقل از عفونت ویروسی است و می تواند به طور گسترده ذرات ویروسی با فعالیت آنزیمی را غربال کند.

• توضیح معافیت: هم ICH Q5A(R2) و هم فارماکوپه چینی (نسخه 2025) به وضوح بیان می کنند که این آزمایش برای سلول هایی که رتروویروس ها را تولید می کنند (مانند سلول های جوندگان، حشرات و پرندگان خاص) مورد نیاز نیست.

• الزامات جایگزین: در موارد معافیت، باید آزمایش جامع تری برای نوع ذرات ویروس، کمیت و عفونت زایی انجام شود.

PCR یا سایر روش های خاص in vitro

بر اساس ویژگی گونه‌ای سلول‌ها، زمانی که نتایج فعالیت رونوشت معکوس مشخص نیست یا قابل اندازه‌گیری نیست، می‌توان از روش‌های شناسایی رتروویروس اختصاصی گونه‌ها استفاده کرد، مانند رتروویروس PCR، ایمونوفلورسانس، ELISA، و غیره. PCR کمی رتروویروس‌ها نیز می‌تواند برای تعیین کمیت رتروویروس استفاده شود.

• موقعیت یابی اولیه: معمولاً به عنوان مکمل مهمی برای روش های اصلی ذکر شده در بالا و ابزاری برای تأیید ویژگی استفاده می شود.

• سناریوهای کاربردی: معمولاً برای تشخیص و تعیین کمیت ویروس های خاص شناخته شده (مثلاً qPCR)، یا برای ارائه شواهد در سطح مولکولی در مواردی که نتایج آلودگی/ میکروسکوپ الکترونی مشکوک هستند، استفاده می شود.

• مبنای نظارتی: کاربرد آن نیاز به اعتبارسنجی کامل دارد و باید با دستورالعمل های مربوطه برای اعتبارسنجی روش های تشخیص خاص در بازار هدف (مثلاً فارماکوپه چینی (نسخه 2025)) مطابقت داشته باشد.

خدمات حرفه ای

حفاظت جامع برای شما

رویکرد انطباق جهانی

روش‌های آزمایش ما عمیقاً با الزامات اصلی ICH Q5A (R2)، فارماکوپه چینی (2025)، USP، و EP یکپارچه شده‌اند، و یک سرویس- را پوشش می‌دهند که تست عفونی، میکروسکوپ الکترونی عبوری (TEM) و تشخیص فعالیت رونویسی معکوس را ارائه می‌کند، و به طور موثر در ایالات متحده، برنامه‌های چندگانه و همزمان اروپا را پشتیبانی می‌کند.

قابلیت تشخیص طیف وسیع-

ما انواع رده‌های سلولی حساس و روش‌های بالغ برای سناریوهای خطر مختلف داریم که می‌توانند به طور موثر پاتوژن‌های هدف از جمله رتروویروس‌های موش، رتروویروس‌های تروپیسم و ​​رتروویروس‌های حشرات را شناسایی کنند و از طیف وسیع و ویژگی تشخیص اطمینان حاصل کنند.

پلت فرم میکروسکوپ الکترونی خود

ما میکروسکوپ الکترونی انتقالی با وضوح بالا-و یک تیم فنی حرفه ای ارشد برای دستیابی به کنترل کیفیت حلقه بسته در کل فرآیند از آماده سازی نمونه تا خروجی داده داریم. ما همچنین می‌توانیم خدمات کمی سریع برای مواد خام (UPB) ارائه دهیم تا تأیید صحت پاکسازی ویروس پایین‌دست را به‌طور دقیق پشتیبانی کنیم.

اعتبار سنجی روش جامع

همه روش‌ها تحت استانداردهای GMP/GLP انجام می‌شوند و کاملاً از فارماکوپه چینی (نسخه 2025) و ICH Q2 (R2) برای اعتبارسنجی جامع ویژگی‌ها، محدودیت‌های تشخیص و غیره پیروی می‌کنند. ما مدیریت کامل{4} چرخه پروژه از طراحی پروتکل تا پشتیبانی برنامه را ارائه می‌کنیم و از انطباق داده‌ها و قابلیت اطمینان اطمینان می‌دهیم.

حفاظت از یکپارچگی داده ها

از دریافت نمونه و اجرای آزمایش تا صدور گزارش، ما یک سیستم کیفیت کامل را ایجاد کرده‌ایم که با اصول GMP و ALCOA+ مطابقت دارد. از طریق بررسی حرفه‌ای داده‌های چند سطحی-و مکانیزم کنترل انحراف قوی (CAPA)، ما اساساً از تحویل با کیفیت بالا و قابل بازرسی برای هر پروژه اطمینان می‌دهیم.