مطالعه اعتبار سنجی پاکسازی ویروس: استراتژی سازگاری برای اعلامیه سه گانه NMPA/FDA/EMA

سیستم نظارتی NMPA

پس از بیش از 20 سال توسعه، سیستم نظارتی ایمنی ویروس NMPA یک چارچوب نظارتی نسبتاً کامل را تشکیل داده است. اسناد اصلی عبارتند از: «روش‌های فنی و دستورالعمل‌های اعتبارسنجی برای حذف/غیرفعال‌سازی ویروس‌ها از فرآورده‌های خونی» (Sinopharm [2002] No. 160) در سال 2002 به عنوان اولین سند راهنمای ویژه. 2005 "اصول کلی برای بررسی فنی ارزیابی ایمنی ویروسی محصولات استخراج بافت بیولوژیکی و محصولات بیان سلولی یوکاریوتی" به عنوان چارچوب اساسی برای بررسی فنی. 2024 "رهنمودهای فنی برای اعتبار سنجی پلت فرم های فرآیند پاکسازی ویروسی برای آزمایشات بالینی محصولات پروتئین نوترکیب درمانی (اجرای آزمایشی)" به عنوان یک سند نوآورانه که برای اولین بار مفهوم اعتبار سنجی پلت فرم را معرفی می کند. و مقررات عمومی 0238 "کنترل ایمنی ویروس های محصولات بیولوژیکی" در نسخه 2025 فارماکوپه چینی. شایان ذکر است که NMPA به وضوح اعلام کرده است که به تدریج با ICH Q5A (R2) هماهنگ خواهد شد و دستورالعمل تأیید پلت فرم برای سال 2024 بازتابی از این روند است.

سیستم تنظیم مقررات FDA

FDA's viral clearance verification requirements rely primarily on the following documents: ICH Q5A (R2) Guidelines, which FDA adopted as the Guidance for Industry in January 2024; USP Section < 1050.1 >، که راهنمایی فنی در سطح کلی-در مورد طراحی، ارزیابی، و توصیف روش های پاکسازی ویروسی ارائه می کند. و سمپوزیوم دوسالانه پاکسازی ویروسی FDA (اخیراً در سال 2023)، که بستری را برای صنعت فراهم می‌کند تا با تنظیم‌کننده‌ها تعامل رودررو داشته باشند. یکی از ویژگی های قابل توجه رویکرد FDA به اعتبار سنجی پاکسازی ویروسی این است که مستندات نکات قابل توجه آن و نتایج کارگاه های آموزشی PDA تأثیر عمیقی بر عملکرد صنعت دارد.

سیستم نظارتی EMA

چارچوب نظارتی EMA برای ایمنی ویروسی شامل دستورالعمل های CPMP/BWP/268/95 برای طراحی مطالعات اعتبار سنجی ویروسی (1996) است که با ich Q5A هماهنگ و به روز شده است. دستورالعمل‌های EMEA/CHMP/BWP/398498/2005 برای ارزیابی ایمنی ویروسی داروهای بیوتکنولوژیکی برای آزمایش‌های بالینی، که الزامات داده ایمنی ویروسی را برای مراحل مختلف کارآزمایی بالینی روشن می‌کند. و فارماکوپه اروپایی (Ph. Eur.) (فصل 5.1.7 "ایمنی ویروسی"). یکی از ویژگی های قابل توجه EMA الزامات دقیق آن برای درمان آماری مطالعات اعتبار سنجی ویروسی است و ارزیابی آماری تیتر ویروسی و محاسبه فاکتورهای کاهش به طور خاص در ضمیمه CPMP/BWP/268/95 مورد بحث قرار گرفته است.

نشان دهنده سازگاری الزامات انتخاب ویروس

جدول 1 مقایسه الزامات انتخاب ویروس با سه مکان نشان داده شده است

همانطور که از جدول 1 مشاهده می شود، این سه مکان در اصول اصلی که انتخاب ویروس را نشان می دهد بسیار سازگار هستند و همگی نیازمند یک ارزیابی مبتنی بر ریسک{1}}برای پوشش دادن ویروس ها با ویژگی های فیزیکی و شیمیایی مختلف مانند پوشش لیپیدی/غیر{2}}، DNA/RNA، و بزرگ/کوچک هستند. این درجه بالایی از سازگاری، مبنای محکمی برای طراحی یک برنامه ویروسی شاخص یکپارچه که نیازهای سه مکان را برآورده می کند، فراهم می کند.

محدود کردن سازگاری الزامات اعتبارسنجی مدل

هر سه مکان مستلزم آن هستند که مدل کاهش یافته بتواند عملکرد حذف ویروس در فرآیند تولید را نشان دهد و در پارامترهای فرآیند کلیدی سازگار باشد. این در ICH Q5A (R2) بخش 6.2.2 توضیح داده شده است. تفاوت های ظریف زیر در الزامات خاص سه مرجع نظارتی وجود دارد: FDA و EMA تاکید بیشتری بر نمایش علمی تقویت خطی/غیرخطی مدل کاهش یافته دارند. NMPA الزامات ارزیابی نمایش محصول صریح تری را برای تأیید مدل کاهش یافته در دستورالعمل های تأیید پلت فرم ارائه می کند. و EMA CPMP/BWP/268/95 روشهای ارزیابی آماری خاصی را در پیوست ارائه می دهد.

سازگاری مکانیک غیرفعال سازی با بدترین شرایط

هر سه مکان مستلزم آن است که تحقیقات تأیید غیرفعال‌سازی باید شامل تحقیقات مکانیک غیرفعال‌سازی باشد. NMPA «روش‌های فنی و دستورالعمل‌های اعتبارسنجی برای حذف/غیرفعال‌سازی ویروس‌ها از فرآورده‌های خونی» به وضوح مستلزم این است که «دینامیک غیرفعال‌سازی ویروس، از جمله میزان غیرفعال‌سازی ویروس و منحنی غیرفعال‌سازی، باید مورد مطالعه قرار گیرد». FDA همچنین بر اهمیت منحنی‌های جنبشی غیرفعال‌سازی در ارزیابی اثربخشی فرآیندهای غیرفعال‌سازی در سمپوزیوم پاکسازی ویروسی 2023 تاکید کرد. هر سه مکان در بدترین شرایط{4}}به تأیید نیاز دارند، اما NMPA بدترین-پارامترهای مورد را با جزئیات بیشتر در دستورالعمل‌های تأیید پلت فرم فهرست می‌کند.

سازگاری روش های محاسبه آماری LRV

جدول 2 مقایسه روش های محاسبه آماری LRV در سه مکان

این سه مکان در روش محاسبه LRV کاملاً سازگار هستند و همه از فرمول log10 (N0/N) استفاده می کنند. تفاوت اصلی این است که EMA الزامات سخت گیرانه تری برای ارزیابی فاصله اطمینان دارد (پیوست های I و II روش های آماری دقیق را ارائه می دهند)، در حالی که NMPA، در حالی که استفاده از فواصل اطمینان را توصیه می کند، آنها را الزامی نمی کند.

طراحی راه حل یکپارچه بر اساس ICH Q5A (R2)

با توجه به اینکه ICH Q5A (R2) توسط مقامات نظارتی سه مکان پذیرفته شده است، طراحی یک طرح تأیید یکپارچه بر اساس الزامات اصلی Q5A (R2) مؤثرترین راه برای دستیابی به هماهنگی این سه مکان است. در اینجا چند پیشنهاد وجود دارد:

ابتدا از ترکیب یکنواختی از ویروس های شاخص استفاده می شود. توصیه می‌شود حداقل حاوی ویروس‌های زیر باشد: MVM یا PPV (ویروس کوچک بدون پوشش لیپیدی)، PRV یا HSV (ویروس بزرگ با پوشش چربی)، X{2}}MuLV (مدل رتروویروسی)، BVDV یا VSV (ویروس متوسط ​​با پوشش لیپیدی)، و ویروس Reo{4}. این ترکیب قادر است به طور کامل ICH Q5A (R2) و الزامات ویروس دستورالعمل سه مقام نظارتی را پوشش دهد.

دوم، از یک طرح یکپارچه مدل کوچک استفاده کنید. اطمینان حاصل کنید که مدل کاهش‌یافته یک فرآیند تولید تجاری را بر روی پارامترهای فرآیند کلیدی نشان می‌دهد و مطابق با نیاز Q5A (R2) کاملاً تأیید شده است. توصیه می‌شود که مقایسه ویژگی‌های کیفیت محصول، پارامترهای فرآیند کلیدی و تنوع فرآیند در اعتبارسنجی مدل کوچک‌سازی شده گنجانده شود.

سوم، یک روش تجزیه و تحلیل آماری یکپارچه را اتخاذ کنید. توصیه می شود که فاصله اطمینان 95% برای LRV در تمام مطالعات اعتبارسنجی محاسبه شود تا الزامات اجباری EMA و توصیه های NMPA/FDA برآورده شود. در عین حال، به جای تکیه بر یک آستانه، از روش های ارزیابی جامع در ارزیابی اثربخشی استفاده می شود.

استراتژی طراحی سند مدولار

In order to achieve the goal of adapting a report to three regional declarations, it is recommended to adopt a modular document design strategy: core modules (common parts) - including risk assessment reports, narrowed model description and validation data, virus removal verification results for each process step, statistical analysis reports, and overall virus safety evaluation. NMPA Supplemental Module - Includes a declaration form that meets the specific format requirements of the NMPA, a description of the comparison with the requirements of the Chinese Pharmacopoeia, and a description of the response to the NMPA-specific guidelines. FDA Supplemental Module - Includes FDA Guidance Statement of Suitability, Controlled Analysis of USP < 1050.1 >. ماژول تکمیلی EMA - شامل مواد تکمیلی برای تجزیه و تحلیل آماری مطابق با ضمیمه CPMP/BWP/268/95، دستورالعمل‌هایی برای اعلام گام به گام در طول مرحله کارآزمایی بالینی است.

مناسب بودن سه مکان توسط پلت فرم تایید شده است

«راهنمای اعتبارسنجی بسترهای فرآیند پاکسازی ویروسی برای آزمایشات بالینی محصولات پروتئین نوترکیب درمانی (آزمایشی)» صادر شده توسط NMPA در سال 2024 نقطه عطف مهمی در هماهنگی این سه مکان است. دستورالعمل ها به وضوح بیان می کنند که اعتبار سکو برای کاربردهای آزمایشی بالینی برای محصولات پروتئین نوترکیب درمانی تولید شده با استفاده از سلول های پستانداران قابل اجرا است و دامنه کاربرد شامل سه فرآیند است: غیرفعال سازی S/D، غیرفعال سازی pH پایین، و رهگیری و فیلتراسیون ویروس. اگرچه این دستورالعمل در حال حاضر فقط برای حوزه های قضایی NMPA اعمال می شود، الزامات فنی آن بسیار با ICH Q5A (R2) سازگار است، بنابراین استانداردهای فنی هماهنگ را می توان هنگام طراحی طرح های تأیید پلت فرم در نظر گرفت.

برای محصولات ژن درمانی، اگرچه هنوز در محدوده کاربرد تأیید پلت فرم گنجانده نشده است، مفهوم تأیید پلت فرم "بر اساس دانش قبلی کافی داخلی، ارزیابی عملکرد پاکسازی ویروس سایر محصولات مشابه" نیز دارای ارزش مرجع است. با پذیرش کامل ICH Q5A (R2) توسط NMPA، انتظار می رود دامنه اعتبار سنجی پلت فرم بیشتر گسترش یابد.

استراتژی های مقابله ای متمایز

در حین پیگیری سازگاری، الزامات تمایز زیر توجه ویژه ای را می طلبد:

الزامات فاصله اطمینان: EMA یک فاصله اطمینان 95٪ را برای LRV تعیین می کند، که توصیه می شود به طور پیش فرض در پروتکل یکپارچه گنجانده شود تا نیازی به مطالعات تکمیلی نباشد. اگرچه آستانه NMPA بزرگتر یا مساوی 4 لاگ عمدتاً برای فرآورده های خونی است، اما باید طوری طراحی شود که اثر پاکسازی مراحل کلیدی فرآیند کمتر از این سطح نباشد.

مطالعه مکانیک غیرفعال سازی: NMPA به صراحت نیاز به مطالعه مکانیک های غیرفعال سازی ویروسی، از جمله نرخ غیرفعال سازی و منحنی غیرفعال سازی دارد. توصیه می‌شود که طرح‌های نمونه‌گیری چند نقطه‌ای در اعتبارسنجی تمام مراحل غیرفعال‌سازی برای برآورده کردن الزامات خاص NMPA گنجانده شود. الزامات NMPA برای نسل سوم انتقال کور نیز باید در پروتکل آزمایش در نظر گرفته شود.

ارتباط رو به جلو

با توجه به پیچیدگی راستی‌آزمایی پاکسازی ویروس و تفاوت‌های جزئی در سه مقررات محلی، اکیداً توصیه می‌شود که قبل از تعیین طرح راستی‌آزمایی، به طور کامل با آژانس‌های نظارتی مختلف ارتباط برقرار کنید: ارتباط با NMPA می‌تواند از طریق جلسه Pre{0}}IND یا کانال‌های مشاوره فنی عمومی CDE انجام شود، و به ویژه توصیه می‌شود که با پلتفرم تأیید صحت قبل از برقراری ارتباط برقرار شود. ارتباط با FDA می تواند از طریق یک جلسه Pre-IND یا Pre{3}}BLA باشد. ارتباط با EMA می تواند از طریق روش مشاوره علمی انجام شود. در ارتباطات، پیشنهاد می‌شود که بر منطقی بودن نشان دادن انتخاب ویروس، معرف محدود کردن طراحی مدل، مبنای تنظیم بدترین شرایط و ملاحظات ویژه برای محصولات خاص تمرکز شود.